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Tissuelyser-24實驗案例(快速提取DNA或RNA)
TissueLyser -24是小型的采用研磨珠的破碎儀,可同時快速處理24個樣品 TissueLyser-24/48
優(yōu)點: ■ 可同時破碎多至24個樣品 ■ 樣品適配器可在干冰或液氮中預(yù)冷,以避免生物分子降解 ■ 能處理多種樣品,結(jié)果重現(xiàn)性高處理多至24個樣品
TissueLyser -24 裝配上適配器就可以工作了,在2ml 的離心管\中加入樣品和一粒研磨珠,多至24個樣品,然后將管子放入適配器,將適配器擰緊到TissueLyser -24的活塞上,活塞上下快速的震動使得研磨珠在樣品管中震動而將樣品磨碎并勻質(zhì)化。破碎的效果與廣泛使用的TissueLyser II(美國QIAGEN) 相當(圖5、7-9 ),常規(guī)組織使用5 mm鋼珠,必要時可多加1粒,研磨珠與進口的研磨機通用
圖5. 高效破碎組織。各種大鼠的組織使用TissueLyser-24(LT) 和 TissueLyser II 分別破碎A在QIAcube 上使用DNeasy Blood & Tissue Kit 來純化25mg 樣品中的DNA ,產(chǎn)量用分光光度 計測量。B在QIAcube 上使用RNeasy Fibrous Tissue Mini Kit (皮膚, 心臟, 肺) 或RNeasy Lipid Tissue Mini Kit (腦)。來純化20mg 樣品中的RNA ,產(chǎn)量用分光光度計測量。
圖6. 高RIN 值表明RNA 高純度和完整性。大鼠心臟和肺(各20mg )使用TissueLyser -24(LT) 破碎后,在QIAcube 上使用 RNeasy Fibrous Tissue Mini Kit 純化RNA, 用Agilent 2100 bioanalyzer 來分析RIN 值分別為8.3 (心臟)和9 (肺)。
圖7. 完整的蛋白質(zhì)用于各種分析。各種大鼠組織(各25 mg )經(jīng)Allprotect Tissue Reagent 穩(wěn)定后使用TissueLyser-24(LT)或TissueLyser II 破碎,然后使用Qproteome Mammalian Protein Prep Kit 抽提總蛋白,用western blotting 檢測。A 轉(zhuǎn)膜后用Ponceau S 染色 B western Blot 檢測。LT: TissueLyser -24(LT) ;II: TissueLyser II; M: 分子量標記。