- 聯(lián)系人 : 封女士
- 聯(lián)系電話 : 15057010416
- 移動電話 : 15057010416
- QQ : 2880725808
文章詳情
Tissuelyser-24多樣品組織研磨機用于提蛋白的實驗步驟（果蠅
日期：2025-06-25 18:24
瀏覽次數：2000
摘要：
1肝 2腦 3植物 4心臟 5肌肉 6肺 7腎臟 8手工液氮研磨肝.
實驗操作步驟
每50～100mg 組織加入1ml TRIzol
1.加鋼珠1顆,60Hz,1min,每種樣品基本充分勻漿
2. 將上述勻漿液每1ml TRIzol 試劑用量的勻漿液中加入0.2ml氯仿，蓋緊管蓋，手動劇烈震搖15 秒鐘，然后室溫靜置2～3 分鐘。
3. 4℃ 10,000g 離心10 分鐘。
4. 小心吸取上層水相（無色）加入到新試管中，同時計算所吸取的水相體積。不必過多吸取，防止吸入DNA和蛋白雜質（中間層，白色）。
5. 加入所吸取水相等體積預冷的異丙醇，蓋緊管蓋，輕輕搖勻。
6. 室溫靜置10 分鐘，待RNA 充分沉淀（為減少RNA 降解，此步驟可省略）。
7. 4℃ 10,000g 離心10 分鐘。
8. 將上清棄除（注意別丟棄沉淀），每管加入1ml 75%乙醇潤洗，蓋緊管蓋，輕輕晃動試管，以去除殘留的異丙醇和鹽份。4℃ 7,500g 離心5 分鐘。
9. 將上清棄除（注意別丟棄沉淀），打開管蓋，將RNA 沉淀干燥（室溫揮發(fā)或真空干燥）。注意RNA 沉淀不可完全干燥，否則難以溶解。
10. 將RNA 沉淀溶解于適量（20～50μl）的無RNase 水中。如果RNA 沉淀溶解不完全，將使OD260/OD280≤1.6。此RNA 溶液可用于進一步實驗，或者-70℃保存
